杭州浩克生物芯片五標正式實驗染色
1353【產(chǎn)品信息】 無 暫無
查看全文
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品參數(shù)
資料下載
【產(chǎn)品信息】
| 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號 | 規(guī)格 | 價格 |
| 四標建模（非常規(guī)） | HKF2013 | 套 | 3500元 |
石蠟切片免疫熒光實驗步驟
1、 石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ12min-二甲苯Ⅱ12min-無水乙醇Ⅰ6min -95%酒精6min-85%
酒精6min蒸餾水洗。
2、 抗原修復(fù)：組織切片置于盛滿檸檬酸抗原修復(fù)液（PH6.0）的修復(fù)盒中于微波爐內(nèi)進行抗原修復(fù)，中火8min
?；?min中低火7min，此過程中應(yīng)防止緩沖液過度蒸發(fā)，切勿干片。自然冷卻后將玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。
3、 阻斷內(nèi)源性過氧化物酶：切片加上3%的雙氧水，室溫孵育25min，將玻片置PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。
4、 血清封閉:在組化圈內(nèi)滴加3%BSA 均勻覆蓋組織，室溫封閉30min。
5、 加一抗：切片稍甩干后用組化筆在組織周圍畫圈（防止抗體流走），在圈內(nèi)滴加按一定比例稀的抗體覆蓋組織。切片平放于濕盒內(nèi)4°C孵育過夜。
6、 加二抗：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加與一抗相應(yīng)種屬的二抗覆蓋組織，避光室溫孵育50min。
7、 信號放大:將玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min 。滴加相對應(yīng)顏色Flare信號放大試劑，3-5min.將玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min 。雙標或者多標的實驗從這一步結(jié)束后重復(fù)步驟2-7，標記第二個、或者第三個抗體，最后在進入步驟8即可。
8、DAPI復(fù)染細胞核：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加
DAPI染液，避光室溫孵育10min。
9、封片：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后用抗熒光淬滅封片劑封片。
上一篇: 四標建模（常規(guī)指標）下一篇: 五標預(yù)實驗（非常規(guī)）
推薦
-
-
透射電鏡全套(包埋 制片 拍照）
2098服務(wù)介紹： 透射電鏡（TEM）通過對組織細胞樣本進行樹脂包埋切片，60-80nm厚度的超薄切片，經(jīng)過重金屬鉛、鈾染色后于透射電子顯微鏡中進...
查看全文 -
-
